熒光立體顯微鏡細(xì)菌單細(xì)胞分辨率分析顯微鏡
熒光立體顯微技術(shù)
熒光立體顯微鏡對細(xì)菌單細(xì)胞的分辨率很低,因此在微生物學(xué)研究
中的應(yīng)用并不廣泛。但是,熒光立體顯微鏡能夠?qū)χ参锉砻娴奈⑸锛?BR>落進(jìn)行有用的初步觀察研究,例如生物膜和真菌,或者為分辨率的顯微
鏡觀察選擇組織樣品。例如,
在熒光立體顯微鏡下觀察到這些現(xiàn)象是可能的,這是因?yàn)榇蟮募?xì)菌
細(xì)胞聚合體所發(fā)出的高亮度的綠色熒光,而在綠光范圍內(nèi)在苜蓿芽的其
他部位僅有相對很少的自身背景熒光。
免疫電子顯微鏡
盡管在細(xì)胞成像中光顯微技術(shù)發(fā)揮著重要的作用,然而熒光顯微鏡
的分辨率仍然低于電子顯微鏡(EM)?墒,掃描電子顯微鏡(SEM)研究
顯示,植物表面的生物膜是嵌在有機(jī)物質(zhì)上的多種異種微生物的復(fù)雜集
合體。對于研究者而言,令人失望的是電子顯微鏡下的植物上的絕大部
分細(xì)菌細(xì)胞仍然是未知的。幸運(yùn)的是,免疫電鏡的膠體金標(biāo)記技術(shù)為自
然環(huán)境中特定微生物的檢測和揭示微生物細(xì)胞更為復(fù)雜的生物學(xué)現(xiàn)象
提供了新的研究手段。膠體金標(biāo)記技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于將分子原位定位的
高特異性與掃描電鏡的高分辨率結(jié)合起來,故在植物病理學(xué)研究中得到
了廣泛的應(yīng)用。血清型的高分辨率的顯微成像。更重要的是,對鞭毛組
分進(jìn)行免疫檢測使研究者能觀察到沙門菌 Thompson血清型的鞭毛是錨
定在葉面上,這表明鞭毛的作用是使細(xì)胞黏附于植物(圖26.9)。除了免
疫細(xì)胞化學(xué)外,研究者根據(jù)凝集素、酶和蛋白質(zhì)等對特定分子結(jié)合的特
異性開發(fā)了很多其他的細(xì)胞化學(xué)研究方法來用于電子顯微鏡的金標(biāo)記
。