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細(xì)談顯微鏡的兩種照明方法




來源:本站
時間:2010-3-4 10:20:19

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顯微鏡的照明方法有臨界照明科勒照明兩種。
臨界照明的特點(diǎn)是光源的像通過聚光鏡首先聚焦在視場光欄上,然后與視場光欄的像一起聚焦在試樣表面。采用臨界照明可以得到較高的亮度,但要求光源具有非常均勻的輻射表面,否則在視場中將會看到光源的放大影像,這對于觀察顯微組織細(xì)節(jié)和顯微照相都是很不利的。
1893年,科勒(Kohler)提出了一種新的照明方法,它的特點(diǎn)是光源像通過聚光鏡首先聚焦在孔徑光欄上,然后與孔徑光欄的像以前聚焦在武警的后焦面。采用科勒照明可以使物鏡的后焦面得到充分的照明,因而可以較充分地發(fā)揮物鏡的分辨率;它還可以使視場得到非常均勻的照明,對光源均勻性的要求也不像在臨界照明時那樣嚴(yán)格。

明場照明
明場照明是金相顯微鏡主要的照明方式。在明場照明中光源光線通過垂直照明器轉(zhuǎn)90°角進(jìn)入物鏡,垂直地射向樣品表面。由樣品反射回來的光線再經(jīng)過物鏡到目鏡。如果試樣是一個拋光的鏡面,反射光幾乎全部進(jìn)入物鏡成像,在目鏡中可看到明亮的一片。如果試樣拋光后再經(jīng)過腐蝕,試樣表面高低不平,則反射光將發(fā)生漫射,很少進(jìn)入物鏡成像,在目鏡中看到的是暗黑色的像。
在明場觀察時,通常采用兩種垂直照明器。其作用都是使來自光源的光線轉(zhuǎn)90°,不過它們的光路不同,效果也不一樣。一種是用平面玻璃做的垂直照明器。平面玻璃表面與光源光線成45°角,將光線反射進(jìn)入物鏡;由于投射在樣品上的光線是垂直入射,因而成像平坦、清晰。此外,平面玻璃反射可使光線充滿物鏡的后透鏡,有利于充分發(fā)揮物鏡的鑒別能力,適用于中倍和高倍觀察。但是,平面玻璃反射光線損失大,即使采用較好的平面玻璃,較后到達(dá)目鏡的光線也只有四分之一,損失了四分之三,故成像的亮度小,襯度也差。另一種是用棱鏡做垂直照明器。光線經(jīng)棱鏡全反射后略斜射于樣品表面,可造成一定的立體感,有利于觀察表面浮凸。此外這種垂直照明器能使光線全部反射到物鏡后透鏡上,光線損失極少,成像亮度大,有較好的襯度。其缺點(diǎn)是光源光線經(jīng)棱鏡全反射后經(jīng)物鏡后透鏡的一半照射在樣品表面上,而反射回來的光線經(jīng)過透鏡的另一半進(jìn)入目鏡,也就是說物鏡實(shí)際使用的孔徑角減小了一半,即數(shù)值孔徑減小,從而大大減低了物鏡的分辨率,因此只適用于低倍觀察,一般不超過100倍。

暗場照明
在鑒別非金屬夾雜物等特殊用途中,往往要采用暗場照明。暗場照明與明場照明不同,其光源光線經(jīng)聚光鏡透鏡后形成一束平行光線,通過暗場環(huán)形光欄時,平行光線的中心部分被擋住,形成一束管狀光束;然后經(jīng)過平面玻璃反射,再經(jīng)過暗場曲面反射鏡的反射,管狀光束以很大的傾角投射在樣品上。注意的是,管狀光束是從物鏡四周通過的物鏡未通過光線從而未起聚光作用。如果樣品表面平滑均勻,則投射光線以很大的傾角反射出去,光線簿進(jìn)入物鏡,在目鏡中看到的是一片黑暗。如果樣品表面存在高低不平之處,則反射光線就有部分進(jìn)入物鏡而形成明亮的像。這與明場照明下觀察的結(jié)果正好相反。

孔徑光欄
孔徑光欄用來控制入射光束的粗細(xì),其位置靠近光源。一般顯微鏡的孔徑光欄是可以連續(xù)調(diào)節(jié)的 ,當(dāng)孔徑光欄縮小時,進(jìn)入物鏡的光束變細(xì),光線不通過物鏡透鏡組的邊緣,球面像差大大降低。但是光束變細(xì),使物鏡的孔徑角縮小,會使實(shí)際使用的數(shù)值孔徑下降,分辨率降低。當(dāng)孔徑光欄擴(kuò)大時,入射光束變粗,物鏡的孔徑角增大,可以使光線充滿物鏡的后透鏡,這時數(shù)值孔徑可以達(dá)到額定值,分辨率也隨之提高;但是由于球面像差的增加以及鏡筒內(nèi)部反射與炫光的增加,成像質(zhì)量將降低。因此孔徑光欄對成像質(zhì)量影響很大,使用時必須做適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié),不能過大或過小,其合適程度應(yīng)以光束充滿物鏡后透鏡為準(zhǔn),并根據(jù)成像的清晰度來判斷。更換物鏡后,孔徑光欄必須作適當(dāng)調(diào)節(jié)。但是不應(yīng)用它來調(diào)節(jié)視場的亮度。
視場光欄
一般顯微鏡除孔徑光欄外還有一個視場光欄。相對光源來說,其位置在孔徑光欄之后。調(diào)節(jié)視場光欄可以改變顯微鏡視場的大小,而并不影響物鏡的分辨率。適當(dāng)調(diào)節(jié)視場光欄還可以減少鏡筒內(nèi)的反射極炫光,提高成像的襯度和質(zhì)量,但是要注意,視場光欄縮得太小,會使觀察范圍變窄,一般應(yīng)調(diào)節(jié)到與目鏡視場大小相同。

本文關(guān)鍵詞:顯微鏡,金相顯微鏡,物鏡,照明方法

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